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脑立体定位仪实验过程中的注意事项

发布时间:2022-01-07   点击次数:230次
   脑立体定位仪是一种用于微创操作大脑的方法,通过脑图谱和三维坐标系可以准确地定位大脑内部的小目标,并对其执行一些操作,例如消融(切除),活检,病变,注射,刺激,植入等。哺乳动物的大脑是所有器官中最复杂的一部分,结构上分为很多区域和核团,在需要对某个特定核团进行研究的时候就需要通过立体定位技术对其进行精确定位和操作。
  
  在神经科学的研究方法中,为了使各种处理手段(给药、毁损、病毒注射等)或信号采集(微电极、探针)到达目的脑区的相应位置,需要使用脑立体定位技术。
  
  下面详细介绍脑立体定位实验过程中的注意事项:
  1、首先根据以上的注意事项找准脑立体定位点。
  
  2、荧光、有色染料预实验:在病毒注射之前,为了确定核团定位是否正确,推荐神经顺行示踪的DiI染料于注射后1周,神经逆行示踪的荧光金(Flourogold)染料于注射后2周切片,并对照图谱确认注射的核团位点无误,再进行病毒注射,可有效提高病毒标记的成功率。冰冻切片时注意,先从所要核团外开始切(还不到核团所在层面),拿到的切片对照图谱中的一些参照物来判断核团是否准确(对照物可选大而清晰的海马、视交叉,脑室、核团附近的特殊结构如纤维索等等),切片同时注意调节冻台角度,使切片角度与图谱一致。
  
  3、注意小鼠的状态:由于俯卧体位以及脑立体定位仪的夹持,容易造成小鼠窒息死亡,因此需要随时确认小鼠气道通畅。另外,对于手术切开的部位,应适当滴加生理盐水,防止伤口干燥。
  
  4、大鼠颅骨水平位定位操作:定位时将大鼠固定成颅骨水平位后,先定位到前囟,以前囟为原点,向前或向后、向左或向右、向下(先在颅骨上打孔)到达核团位置,需要强调的是,坐标是以前囟为原点,而不是以钻孔后的脑表面为原点。
  
  5、熟能生巧:通过多加练习,最后能根据所用动物的体重对坐标做相应的修正,保证一定得准确率,立体定位也就成功了。

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